ČSN ISO 4832   (560085) Mikrobiologie potravin a krmiv - Horizontální metoda stanovení počtu koliformních bakterií - Technika počítání kolonií

Anotace textu normy ČSN ISO 4832   (560085)

Tato česká norma specifikuje horizontální metodu stanovení počtu koliformních bakterií technikou počítání kolonií. Platí pro výrobky určené pro lidskou výživu a ke krmení zvířat a pro vzorky z prostředí, kde se potraviny vyrábějí a kde se s nimi manipuluje. Inkubační teplota je nově pouze dvojí, tj. 30 °C nebo 37 °C, je předmětem dohody mezi zúčastněnými stranami. V případě mléka a mléčných výrobků je inkubační teplota 30 °C. Tato technika se doporučuje, pokud je očekávaný počet koliformních bakterií vyšší než 100 na mililitr nebo na gram analytického vzorku. Kultivační metoda je založena na zalití inokula předepsanou kultivační půdou. tj. agarem s krystalovou violetí, neutrální červení, žlučovými solemi a laktózou (VRBL) s následným převrstvením utuhlé směsi inokula s půdou VRBL tenkou vrstvou téže půdy. Po ukončení inkubace lze zjistit jednak charakteristické kolonie, což jsou purpurově červené kolonie o průměru nejméně 0,5 mm (někdy obklopené načervenalou zónou precipitované žluče), které se pokládají za typické pro koliformní bakterie a nevyžadují další konfirmaci. A pokud se zjistí atypické kolonie (např. menší) a také všechny kolonie vyrostlé z mléčných výrobků obsahujících jiné sacharidy než laktózu, je třeba je konfirmovat fermentací laktózy s tvorbou plynu, a to kultivací v bujónu s laktózou, brilantovou zelení a žlučí.